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探針法熒光定量PCR試劑盒試驗結果如何計算

更新時間:2024-03-12      瀏覽次數(shù):475
本試劑盒用于測定血清、血漿及相關液體的樣本中指標含量。
芝麻源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒性能:
1.準確性:標準品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值,大于等于0.9900。
2.靈敏度:檢測濃度小于1.0U/L。
3.特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。
4.重復性:板內、板間變異系數(shù)均小于15%。
5.貯藏:2-8℃,避光防潮保存。
6.有效期:6個月。
實驗原理:
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定指標水平。用純化的指標抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入相關指標,再與HRP標記的指標抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的指標呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中指標濃度。
計算:
以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。
 
 
 
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